利用生物信息学工具对Aurora B的核酸序列和蛋白功能结构进行分析。结果:成功构建了pET28a(+)-Aurora B重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的人Aurora B基因序列同源性达到了99%;获得Aurora B蛋…
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related 什么apoptosis inducing legand, TRAIL)是近年发现的具有选择性诱导肿瘤细胞凋亡而对『正常细胞没有毒性的肿瘤坏死因子家族成员。TRAIL可与胞膜死亡受体DR4、DR5结合来激活死亡受体通路,继而通过线粒体通路和非线粒体通路引起肿瘤细胞凋亡。 以TRAIL为基础的肿瘤治疗策略已应用于临床已经试验,越来越多证据表明TRAIL在肿瘤治疗方面具有很大潜力和诸多优势。但单独应用TRAIL治疗血液系统肿瘤存在一定局限性,因为在血液系统恶性肿瘤中,常常因P53基因突变和B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2, Bcl-2)基因的高表达等因素,导致肿瘤细胞对TRAIL敏感性下降,并诱导血液系统恶selleck screening library性肿瘤对TRAIL的耐药。Bcl-2基因最初是在非霍奇金滤泡状B细胞淋巴瘤中分离出来的,是Bcl-2家族蛋白成员中主要的抗凋亡分子,主要分布在淋巴瘤、肝癌、胰腺癌、肠癌、前列腺癌、白血病等恶性肿瘤中,通过与Bcl-2家族的促凋亡蛋白形成异源二聚体,维持促凋亡成员在细胞内的定位分布,保护细胞不进入凋亡程序。 我们猜想TRAIL的高表达和Bcl-2低表达可能对于抑制肿瘤细胞生长具有协同作用。

采用MDC染色检测细胞内自噬泡的产生和分布,结果表明,不论是HL60细胞还是NB4细胞中,Dasatinib作用6小时后,部分细胞内即出现示踪自噬泡的荧光点状分布,作用12小时后细胞核周围区域大量出现点状荧光分布,到24小时后更加明显。通过自噬抑制剂3MA、 Wortmannin和LY294002来下调AML细胞中的自噬水平,流式细胞selleck screening library术检测CDllb结果表明,Dasatinib诱导的AML细胞的分化也因此被抑制。相应地,通过自噬促进剂雷帕霉素(Rapamycin)来增加AML细胞中的自噬水平,Dasatinib诱导的AML细胞的分化水平则被明显上调。将较低浓度的Dasatinib和ATRA同时作用于HL60和NB4细胞,流式细胞术检测CDNutlin-3a供应商11b结果表明,Dasatinib能显著促进ATRA诱导的AML细胞的分化。采用MDC染色观察自噬泡的形成,结果显示在HL60和NB4细胞中,Dasatinib和ATRA共同作用的组别自噬泡大量出现并分散在细胞核周区域,由此可见,自噬可能参与了Dasatinib协同ATRA诱导AML细胞分化的过程。以上实验表以及明,Dasatinib可以诱导AML细胞发生自噬,这种自噬的发生伴随着整个髓性分化进程而存在,同时这种自噬的发生有利于AML细胞的分化。 结论：本论文较为系统地讨论了Dasatinib诱导的AML细胞的分化作用,并对其中的分子机制做了初步探讨。研究表明Dasatinib可以诱导AML细胞分化成为髓系细胞,并且MEK/ERK依赖性的STAT1的激活以及细胞内自噬水平的上调都可能有利于分化进程。

结论:这些实验结果暗示漆黄素可通过调节细胞周期、促进细胞凋亡而明显降低脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移力,从而对脑胶质瘤细胞具有显著的抗肿瘤作用。
内分泌治疗是雌激素受体阳性乳腺癌的重要系统治疗手段,但原发性与继发性耐药是当前内分泌治疗面临的难题。耐药机制主要包括:ER表达缺失或表观遗传修饰;共调因子表达失衡;雌激素受体通Pazopanib细胞系路与生长因子受体(growth factor receptor,GFR)通路的交叉效应;特异性miRNA表达改变;乳腺癌上皮间质转化(EMT)等。根据Pub Med检索获取相关资料,就近年来雌激素受体阳性乳腺癌内分泌耐药机制及治疗策略研究进展进行综述。
目的:通过特异性小干扰RNA(sma更多ll interfering RNA,si RNA),使CDK4基因沉默,探讨该基因沉默对肺癌A549细胞增殖和代谢的影响及其可能的作用机制。方法:将靶向CDK4小干扰RNA(si RNA-CDK4)和阴性对照干扰片段(si RNA-control)成功转染A549细胞后,利用实时荧光定量PSaracatinib购买CR和蛋白质免疫印迹法分别检测CDK4在m RNA和蛋白水平的变化;细胞计数法、CCK-8法和软琼脂糖克隆形成实验检测A549增殖的变化和克隆形成能力;FCM法检测A549细胞的细胞周期;18F-FDG摄取实验、乳酸检测试剂盒及海马技术检测A549细胞中葡萄糖、乳酸的量及氧耗的变化;利用RT-PCR检测CDK4基因沉默后A549细胞中糖代谢相关酶m RNA水平的变化。

4-AN可能下调了Cyclin B1的表达既而阻止了辐射诱导的G2/M期阻滞的发生,继而使受照细胞不能进行有效修复而发生凋亡。
颅内肿瘤大致分为原发性肿瘤和转移瘤。胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤。胶质母细胞瘤(Glioblastoma, GBM)是发病率和恶性程度最高的胶质瘤。标准化治疗后,GBM患者的2年生存期仅有25%。其他系统的恶性肿瘤发生脑转移的几率也非常高Selleckchem GDC 973,例如肺癌发生脑转移5年累积概率为16%,乳腺癌为7%,结肠癌为5%,而黑色素瘤脑转移率可高达40%以上。尽管人们对癌症发生、发展的分子机制了解有了巨大的进步,对治疗恶性肿瘤的靶向药物的研发也有了长足的发展,但是中枢神经系统(Central nervous system, CNS)就像肿瘤细胞的避难所,治疗颅内疾病(如原发颅内恶性肿瘤和转移BMS-907351瘤)的药物很难有效到达颅内病灶,这个问题一直困扰着所有CNS癌症研究者们。这一现象主要是由于血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)的存在而引起的。在正常状态下,BBB起到保护脑组织免受内源性和外源性有毒物质损伤。但是另一方面,这一屏障又可以阻挡大部分传统的或新型药物从血液循环系统进入脑实质或者脑内病灶。因此有很多实验在EX 527制造商研究BBB形成的机制,以及如何规避BBB对治疗药物运输的阻碍作用。BBB主要是由血管内皮细胞构成。与身体其他部位的血管内皮细胞相比,BBB内皮细胞的胞膜缺少孔隙,胞饮作用活力低,紧密连接将它们紧紧的连接在一起。而且这些内皮细胞又同时被周细胞、星形细胞等紧密包绕,形成了第二层致密的脂质层。这些特性使得物质很难穿过BBB。一些必需的营养物质(如葡萄糖)进入脑内受一些摄取转运蛋白严格调控。其他物质通过BBB只能依靠被动扩散。

方法收集2010年9月至2012年6月收治的120例非小细胞肺癌患者中选出80例非小细胞肺癌患者,以新辅助化疗前穿刺活检病理组织为对照组,试验组为顺铂联合紫杉醇组,80例患者均为进行新辅助化疗2周期后再行手术的患者。病确认细节理标本采用免疫组织化学方法(SP法)及逆转录PCR法检测pAkt和CDK2在新辅助化疗前及手术后的表达变化情况。进一步分析AKT、CDK2的表达与非小细胞肺癌化疗效果之间的相关性。结果新辅助化selleck疗能有效杀死肿瘤细胞,抑制肿瘤组织的生长,使肿瘤组织缩小,提高临床手术的切除率。免疫组织化学SP法染色表明,新辅助化疗二周期顺铂联合紫杉醇组P-Akt表达均低于新辅助化疗前(P<0.05)。提很少示pAkt、CDK2表达与化疗疗程负相关,随化疗时间的延长,pAkt、CDK2表达降低(P<0.05)。逆转录PCR法检测Akt与CDK基因的表达新辅助化疗二周期顺铂联合紫杉醇组AktRNA的表达低于新辅助化疗前,CDK2RNA的表达均明显低于新辅助化疗前(P<0.05)。

近年来临床研究发现EML4-ALK融合基因是除EGFR突变及KRAS突变之外的另-个重要的酪氨酸激酶抑制剂的作用靶点,该融合基因在年轻、不吸烟或少吸烟、腺癌、无EGFR和KRAS突变的非小细胞肺癌患者中发生率较高,且该融合基因阳性者对酪氨酸激酶抑制剂耐药,对于ALK抑制剂(如克唑替尼)则有良好的治疗反应,关于该药的临床试验表明:总有效率达57%(46例确定为部分缓解因为,1例确定为完全缓解),估计6个月无进展生存概率为72%,常见的副反应是1、2级胃肠道反应。该基因及该药的发现为非小细胞肺癌患者带来了希望。
肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤,其中80%～85%的病例为非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)。据统计,在欧洲,每年肺癌新发病例超过20万,而死亡的人数占所有Selleck Romidepsin癌症相关死亡的20%。在美国,每年约有15万患者死于肺癌[1-3]。在中国大陆,肺癌的发病率和病死率均呈显
近年来,随着各种光学探针的不断出现,非侵入性、可实时观测的动物活体光学成像技术迅速发展。该技术能够在不对活体动物造成额外损伤或仅产生微小损伤的前提下研究生理状态下的生物活体,与传统成像技术互补性强,日益收到国内外学者的重视[1]。但点击此处小动物活体荧光成像目前仍面临2个主要问题:①不透明的生物组织会吸收、反射和散射光子,并产生强烈的自发光,这些问题都会使信号采集和定量变得困难。②生物活体环境非常复杂,对成像用对比剂或发光探
神经母细胞瘤(neuoblastonma,NB)是小儿最常见的实体肿瘤之一,临床表现变异较大,高危NB进展迅速,即使行高强度清髓化疗,肿瘤复发仍然常见,死亡率较高为发现有效NB治疗药物和靶点,必须充分研究认识NB发病机制中的关键分子。

其中病人的肝癌分期尤其重要。所以应有一个适合的肝癌分期,才能作出最适合的治疗方法,又能初步评估患者的预后。但目前肝癌有多种分期方法或评分系统。从1971年的Kampala分期到目前NCCN/AJCC的TNM分期,共有十余种分期系统及各种生物预后分子标志物。由于世界各地原发性肝癌病因的流行病学资料不同,肝脏合并病变各异,诊断水平及治疗水平也不一样,出现了许EPZ-6438小白鼠多不同的肝癌分期方法,至今尚未形成一个公认的、最好的分期方法。 在中国,90%以上的肝癌患者曾接受中医药治疗。近年来,中医药在晚期肝癌的作用也越来越受重视,中医药在改善症状、延长生存期及提高生活质量等方面有一定作用,但目前缺乏中医药治疗恶性肿瘤的疗效评价标准及预后评价系统。目前常用的各种分期或生物标记物能否反映中医药治疗中晚期肝时间癌的疗效是许多学者思考的问题。健脾理气法是肝癌最主要的治疗方法,其在广东省中医院广泛应用,取得一定的效果。本研究拟采用不同的分期方法对新健脾理气方治疗肝癌的预后价值进行比较研究,以期探索适合评价中医药治疗肝癌的分期方法。 目的： 评估原发性肝癌不同分期方法或评分系统(包括中国肝癌分期、Okuda分期、CLIP评分、French分通常期及BCLC分期)对新健脾理气方治疗肝癌的预后价值,探索适合评价中医药治疗肝癌的分期方法或评分系统。 方法： 本研究分两部份。首先通过检索国内外文献,分析不同分期的优点及不足,筛选出能用于评估中医药治疗预后的分期或评分系统。最后采用回顾性的研究方法,以2007年5月至2009年12月在广东省中医院就诊接受新健脾理气方治疗的151例原发性肝癌患者为研究对象。所有患者按照筛选出来的各种分期方法或评分系统进行再分期。

总体上来说，当BRAFV600E突变时，在大鼠钠碘同向转运体NIS启动子的主要功能区域H3K9/14，H3K18，总H4,H4K16乙酰化水平降低，H3K9/14，H4K16的乙酰化可能在调节大鼠钠碘同向转运体NIS表达中发挥更显著的作用。BRAFV600E突变对钠碘同向转运体NIS启动子区域乙酰化水平的影响可能是通过MAPK信号通路。 我们的研究证实了伴有Bleomycin数据表BRAFV600E的甲状腺癌患者钠碘同向转运体NIS基因表达降低可能是因为BRAFV600E突变下调钠碘同向转运体启动子主要功能区乙酰化水平，MAPK信号通路也在该调节中发挥作用。此研究为日后特异性靶向药物治疗伴有BRAFV600E突变的甲状腺癌患者提供理论依据。
研究背景 卵巢癌是病死率最高的妇科恶性肿瘤,而早期诊断技术以及长期没有有效的治疗方案的缺乏是卵巢癌病死率居高不下的原因。因此,寻找新的肿瘤标记物和治疗靶标一直以来都是卵巢癌研究领域的热点。 长链非编码RNA (long non-coding RNA, lncRNA)是一类长度大于200nt、不具备蛋白编码功能的RNA。与niRNA等小分子非编码RNA相比,lncRNA近几年才开始受到关注。然而,已有越确认细节来越多的研究显示1ncRNA能够在染色质修饰、转录或转录后等水平调控下游基因的表达,进而参与细胞增殖、凋亡及侵袭等多种生物学过程并与肿瘤等疾病的发生发展相关。近年来,基因芯片和高通量测序技术在lncRNA的研究中发挥了重要作用。 Matastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1(MALATl)是一个长约8,000nt的非编码RNA,在正常人体组织中普遍表达。

3.细胞凋亡检测 分别收集对数生长期K562细胞及K562/DNR细胞,用不同浓度乌索酸作用,溶剂作为对照,培养一定时间后,分别收集1×10~6细胞,经Annexin/PI双染色,流式细胞仪检测。 4.细胞凋亡机制研究 用Western Blotting技术分析乌索酸引起K562细胞及K562/DNR细胞凋亡的可能机制。对数生长期细胞,加不同浓度乌索酸处理一并且定时间,收集细胞。提取的蛋白经12.5%SDS-PAGE电泳分离,电转移至硝酸纤维素膜上,经邻联(二)茴香胺,o-dianidine和β奈酚磷酸(β-naphthyl acid phosphate)显色后检测各种蛋白活化情况。推测出可能的凋亡机制。 结果 1.乌索酸能抑制K562细胞与K562/DNR细胞增殖。 2.乌索酸能诱导K5Protease Inhibitor Library cell assay62细胞与K562/DNR细胞凋亡,随着浓度和作用时间的增加,细胞凋亡率升高。 3.经乌索酸处理后,K562细胞与K562/DNR细胞中活化的Caspase-3,和Caspase-9较对照组明显增加。 4.无血清培养24h的K562细胞与K562/DNR细胞,经乌索酸处理后,发现细胞中AKT的磷酸化即活化受到明显抑制。 5.经乌索酸不处理后,K562细胞与K562/DNR细胞胞浆中活化的Cyt-C较对照组明显增加。 结论 乌索酸能够通过线粒体途径诱导K562细胞与耐柔红霉素的K562细胞凋亡,其机制可能与抑制Akt的磷酸化相关。
研究目的：食管鳞癌是一种常见的预后较差的胃肠道恶性肿瘤,尽管目前手术、放疗及化疗等手段不断改进,食管鳞癌患者的5年生存率仍不足30%。食管鳞癌预后主要与肿瘤侵犯的深度、转移淋巴结数目、远处转移与否等有明显相关性。

探讨UHRF2分别在正常细胞和癌细胞中对K3K9ac和H3K14ac的影响及其分子机制。方法1. 在HEK293、LO2和HepG2细胞中转染UHRF2,进行免疫荧光后,激光共聚焦检测UHRF2与组蛋白H3、H3K9ac和H3K14ac在细胞内的共定位现象。再在上述细胞中转染UHRF2和空载质粒,采用免疫沉淀技术,研究UHRF2与H3K9ac和H3K14ac的相互作用。2. 不通过双酶切鉴定UHRF2各缺失体质粒,将各缺失体质粒转染HEK293、LO2和HepG2细胞,进行免疫沉淀实验。研究UHRF2与H3K9ac和H3K14ac相互作用的结合区域。3. 通过免疫印迹和免疫组化化学方法检测内源性UHRF2、H3、 H3K9ac和H3K14ac蛋白在HEK293、LO2和HepG2细胞中以及在肝癌和癌旁组织中的表达情况。4.Quisinostat化学结构 采用瞬时转染技术上调UHRF2蛋白,通过免疫印迹检测UHRF2在HEK293、LO2和HepG2细胞中对H3K9ac和H3K14ac影响。同时通过免疫组织化学检测肝癌标本中UHRF2蛋白水平的高低与H3K9ac和H3K14ac蛋白表达情况的相关性。结果1. 激光共聚焦实验结果显示：UHRF2与H3、H3K9ac和H3K14ac在HEK293、LO2为什么和HepG2细胞内均有存在共定位现象。免疫沉淀实验结果表明:UHRF2与H3K9ac在上述细胞中相结合存在相互作用。2. 免疫沉淀实验结果表明：在HEK293、LO2和HepG2细胞中PHD结构域是UHRF2与H3K9ac相互作用的关键结合区域,此外在HepG2细胞中除了PHD结构域外,YDG结构域也是UHRF2与H3K9ac相互作用关键结合区域。3. 免疫印迹结果显示：H3K9ac和H3K14ac在HepG2肝癌细胞中高表达。