处理后表皮片移植于裸鼠全层皮肤下,分别于3、5、7d取出移植皮片,采用免疫组织化学染色、流式细胞仪检测、Western blot和RT-PCR等方法检测皮片移植前后表型的改变和ERK MAPK通路各信号分子表达的变化情况。结果去基底细胞层处理的表皮片干细胞标志物CK19和β1整合素染色阴性;移植后5d,存活皮片CK19和β1整合素染色呈多层分布,而不是正常表皮中或的单层分布。流式细胞仪检测结果显示,表皮片移植后CK19阳性细胞和β1整合素阳性细胞由移植前的0.00%分别增加到7.54%和5.24%,而CK10阳性细胞由99.62%下降为86.56%。Western blot和PCR检测也证实CK19和β1整合素蛋白水平和mRNA水平表达在移植后明显增强。ERK及上下游信号分子(p-Raf、p-M什么EK1/2、p-ERK1/2和c-myc)表达增强。t-MEK1/2和t-ERK1/2移植前后表达无显著差异(P>0.05)。结论处于终末分化阶段的表皮细胞可以向干细胞状态逆转,这个过程可能与ERK MAPK信号通路有关。”
“采用定位突变和重叠延伸PCR方法扩增尿激酶催化结构域基因片段,将其克隆至表达载体pPICZαA上,转化毕氏酵Nutlin-3订单母X-33。重组蛋白通过阳离子琼脂糖柱纯化、凝胶层析柱检测,纯度达到99%以上,该重组的尿激酶催化结构域(C279A/N302Q/S356A)不具有丝氨酸蛋白酶活性。用气相扩散法获得蛋白晶体,其衍射分辨率达1.77(?),结构解析发现在其复合物结构中有三个抑制剂分子苯甲醚。”
“目的:探讨外源性基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)抑制剂强力霉素对肺缺血再灌注损伤炎性反应的影响。

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“目的以正品赤芝药材为基础,建立灵芝三萜类化合物的高效薄层荧光色谱指纹图谱及HPLC指纹图谱,并与紫芝进行比较分析。方法应用硅胶GF254高效预制薄层板,通过二次展开,10%硫酸乙醇溶液显色后获得薄层荧光色谱指纹图谱;同时利用HPLC法建立赤芝药材的HPLC指纹图谱共有模式。结果赤芝薄层荧光色谱指纹图谱由9半抑制浓度个特征荧光条斑组成,荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析比较,可分为赤芝指纹图谱模式、紫芝指纹图谱模式;赤芝的HPLC指纹图谱共有18个特征峰,其中6个成分通过对照品得到指认。结论通过色谱指纹图谱考察,赤芝与紫芝在三萜类化合物方面区别较大,建议区分应用。”
“蛋白质的磷酸化是一种可逆性的以及翻译后修饰,在细胞的增值、分化、信号转导以及转录与翻译调控、蛋白质复合体的形成、蛋白质降解等方面发挥着极为重要的作用。因此磷酸化蛋白的鉴定成为翻译后修饰研究的重要内容。但由于磷酸化蛋白的丰度较低,难以用质谱直接检测。为了解决这个问题,改善质谱对磷酸肽的信号响应,需要对磷酸化蛋白质或磷酸肽PLX3397体内进行富集。本文系统地介绍了磷酸化蛋白组学研究中应用较为广泛和最新建立的各种分离富集方法的原理、特点、应用研究进展,包括抗体富集法、激酶特异富集法、亲和富集法、化学修饰法、多种色谱分离富集方法以及MALDI靶盘富集法。”
“4-氟苯酚经取代、酯水解、氯化、傅克酰基化和羟醛缩合得到了一系列新的噢哢类衍生物分子探针,总收率为34%~36%,产品结构经IR和1HNMR确认。

方法对大接骨丹95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位进行色谱分离,通过波谱分析或直接与对照品对照进行结构鉴定。结果分离得到13个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(Ⅱ)、硬脂酸(Ⅲ)、软脂酸(Ⅳ)、syringoylglycerol(Ⅴ)、2H-1-benzopyr-an-2-one(Ⅵ)、3,5-二甲氧基苯甲醛(Ⅶ)、β-胡萝卜苷(Ⅷ)、9HAZD5363临床实验-pyrano[2,3-f]-1,4-benzodioxin-9-one(Ⅸ)、(E)-对甲基苯丙烯醛(Ⅹ)、7-羰基-β-胡萝卜苷(Ⅺ)、邻,对-二甲氧基苯甲酸(ⅩⅡ)、10-griselinosidic acid(ⅩⅢ)。结论化合物Ⅱ、Ⅴ~Ⅶ、Ⅸ~ⅩⅡ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅸ为首次从鞘柄木属植物中分离得到。”
“为Nutlin-3a浓度研究通过抑制消减杂交筛选出的cdk2ap1基因在鸡胚胎发育过程中的表达,设计cdk2ap1引物并通过RT-PCR扩增cdk2ap1基因片段,构建cdk2ap1/pGEM-T重组质粒。以构建的重组质粒为模板,使用Sp6和T7RNA聚合酶合成地高辛(dig)标记的正、反义RNA探针,借助胚胎整体原位杂交技术研究了cdk2ap1在雌雄鸡胚中的表查找更多达。结果表明cdk2ap1基因在4.0d两性胚胎的脑间质、菱脑、听囊、脊神经管、前肢等部位均有表达,且在雄性鸡胚中的表达量高于雌性;在雄性鸡胚的生殖脊、后肢部位中该基因有表达但在雌性胚胎对应部位却基本没有表达。鉴于该基因在雌雄鸡胚中的差异表达,推测cdk2ap1基因在鸡胚性别分化及性腺发育过程中起一定调节作用。”
“本研究旨在探讨复方浙贝颗粒联合阿霉素对K562/A02移植瘤细胞凋亡及BCL-2、BAX蛋白表达影响。

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“目的探讨大鼠脑缺血-再灌注时ε型蛋白激酶C(PKCε)与热休克蛋白70(HSP70)表达间关系。方法60只大鼠,随机分成缺血-再灌注组及假手术组,根据再灌注时间的不同,分别分为再灌注1、6、12、24、48、72h亚组,应用蛋白印迹法观察缺血皮层、基底节区各时间点胞浆内PKCε及HSP70及胞膜PKCε的表达。结果脑缺血后再灌注1h胞浆内PKCε含量开始下降,FK228临床试验至再灌注24h达最低点,持续至再灌注72h。而膜内PKCε变化趋势与此相反,含量逐渐上升,于再灌注24h达到最高。再灌注1hHSP70有少量表达,再灌注6h即增高,至再灌注48h达最高,再灌注72h稍有减弱。假手术组各时间点均低含量表达。脑缺血-再灌注时HSP70与胞膜PKCε表达呈正相关,但无差异性,(r=0.55,P>0.05);HSP7Antidiabetic Compound Library0与胞浆内PKCε表达间呈显著负相关(r=-0.672,P<0.05)。结论脑缺血再灌注时缺血皮层、基底节区PKCε发生了膜转位激活现象,同时有HSP70的表达,两者间呈一定的相关性。"
“芳香化酶是药物预防及治疗乳腺癌等雌激素依赖性疾病的一个重要靶点。综述近10年来,从天然产物及其衍生物中发现的具有芳香化酶抑制活性的化合物,通过对其化学结Selleck构、生物活性进行总结,并探讨构效关系,为新型芳香化酶抑制剂的研发提供参考。”
“将20头荷斯坦产奶奶牛随机分为对照组和试验Ⅰ～Ⅲ组,对照组饲喂全混日粮(TMR),试验Ⅰ组每头奶牛每天饲喂TMR加150.0g复合脂肪酸,试验Ⅱ组每头奶牛每天饲喂TMR加150.0g乳酸,试验Ⅲ组每头奶牛每天饲喂TMR加150.0g复合脂肪酸/乳酸(质量比为1∶1),分析探讨了复合脂肪酸和乳酸对奶牛粪尿、氮、总磷排泄量和CH4释放量的影响。

结果该建设项目在生产过程中存在氮氧化物、一氧化碳、臭氧、锰及其无机化合物、电焊烟尘、氧化锌、其他粉尘、盐酸、硫酸、氢氟酸、三氧化铬、可溶性镍化合物、氨、硝酸、磷酸、硼酸、氰化物、甲苯、二甲苯、三氯乙烯、环己酮、丙酮、乙酸丁酯、氢氧化钠、碳酸钠、噪声、高温、紫外线、工频电场等职业病危害因素,该拟建项目属职业病危害严重的建设项目。结论该项目在生产过程中可能产生的职业病危害是可以预防的,从职Roxadustat体外业卫生角度分析该项目是可行的。”
“目的观察细胞因子信号负调控因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)对人肺腺癌细胞株A549侵袭能力及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)磷酸化水平的影响。方法建立SOCS3稳定表达细胞株;Boyden Chamber分析法测定细胞的侵袭能力;RTGSK1120212-PCR检测FAK mRNA表达水平;Western blot检测FAK和磷酸化FAK表达水平。结果在纤维粘连蛋白(fibronectin,Fn)介导下,SOCS3加Fn组A549细胞穿过滤膜细胞数显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);A549细胞各组细胞间FAK mRNA水平差异无统计学意义;而SOCS3加Fn组细胞FAK蛋白及磷酸化FAK蛋白水平显著EPZ 6438下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SOCS3从转录后水平调控FAK表达和活性从而降低A549的体外侵袭能力。"
“目的:研究醋酸甲羟孕酮体外诱导卵巢癌SKOV-3细胞株凋亡的作用机制。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定不同浓度醋酸甲羟孕酮(1×10-4、1×10-3、1×10-2和1×10-1mmol/L)和LY294002(PI3K抑制剂,1.4×10-3mmol/L)对人卵巢上皮癌SKOV-3细胞株生长的抑制作用。

EGFR基因突变具有癌变作用,可能影响到非小细胞肺癌预后、化疗和靶向药物的疗效。”
“目的:通过对马缨丹的叶和花部位挥发油中化学成分的分析比较研究,为马缨丹的开发利用提供依据。方法:采用水蒸气蒸馏法提取马缨丹不同部位的挥发油,应用气相-质谱-计算机联用技术进行分析和鉴不要定,并用峰面积归一化法测定各化学成分的相对含量。结果:从马缨丹的叶部位挥发油鉴定了48个化学成分;从花部位挥发油鉴定了45个化学成分;共有化学成分27个。结论:马缨丹的叶和花部位挥发油中主要化学成分都为倍半萜类化合物。”
“以绿茶茶汤为原料,半抑制浓度采用同时蒸馏萃取法(SDE)、顶空进样法(HS)、顶空固相微萃取法(HS-SPME)3种方法提取茶汤香气成分并进行了GC-MS分析。结果表明,3种方法提取所得茶汤香气成分结果差异很大,其中,HS法萃取到的香气物质的种类和数量最少,而SDE法虽然BMS-907351供应商萃取的香气物质的总量、数量也较多,但不能反映茶汤的真实香气。HS-SPME法提取所得风味组分数量最多,且能较真实地反映茶叶本身的香气特征,是一种较好的茶饮料香气提取方法。”
“目的对凤眼草的质量分数95%乙醇提取物进行分离并鉴定。方法采用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱等方法分离纯化,1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定。