05)。与正常组比较,模型组大鼠精子数量较少且形态异常(P<0.05);与模型组比较,金匮组和阻滞剂组睾酮(T)、雌二醇(E2)、精子密度和活率升高(P0.05)。结论金匮肾气丸可改善肾阳虚模型大鼠精子质量和性激素水平,其机制可能是通过抑制睾丸TGF-β1受体表达、促进CYP19表达进而影响精子发育与增殖。
目的:探讨雌激素对小鼠泌尿生殖系统以及人子宫内膜癌细胞系中的LOX家族基因表达的影响。创新点:系统地研究了雌二醇在小鼠泌尿生殖系统(子宫、阴道和膀胱)以及人子宫内膜癌细胞系中对LOX家族基因表达的影响;提出了转化生长因子-β(TGF-β)信号通路可能在雌二醇调节LOX家族中发挥作用。方法:使用雌二醇对卵巢快速衰老小鼠和人子宫内膜癌细胞系进行处理,然后通过荧光实时定量聚合酶链式反应(PCR),分别从体内和体外研究雌二醇对LOX家族基因表达的影响(图2~5)。在人子宫内膜癌细胞系中加入TGF-β1,通过荧光实时定量PCR,检测LOX家族基因表达的变化(图6)。利用人子宫内膜癌细胞系为对象,进行分组研究:一组无任何处理,为对照组;一组只加雌二醇;一组则同时加入雌二醇和TGF-β受体抑制剂(SB431542)。24小时后,检测LOX家族基因及TGF-β1的表达(图6)。结论:雌二醇可以促进卵巢快速衰老小鼠和人子宫内膜癌细胞系中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3、LOXL4和TGF-β1表达的升高,其中雌二醇很有可能是通过TGF-β信号通路影响LOX家族基因的表达量。由于LOX家族基因与盆腔疾病关系密切,所以我们的发现可能为临床上盆腔器官疾病的预防和治疗提供一些理论基础。
目的:研究转化生长因子β1/整合素连接激酶(transforming
WP1130 growth factor-beta1/integrin-linked kinase,TGF-β1/ILK)信号通路在白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(tubular epithelial-myofibroblast transdifferentiation,TEMT)中的作用,并探讨大黄素是否是通过抑制TGF-β1/ILK信号通路而影响TEMT。方法:以体外培养的正常大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E)为研究对象,分为空白对照组、大黄素对照组、IL-1β诱导组、大黄素阻断组、TGF-β1Ⅰ型受体阻断剂(SB431542)阻断组、大黄素和SB431542共同阻断组、大黄素预处理组和大黄素逆转组。NRK52E细胞在上述处理因素下培养48h后,在倒置相差显微镜下观察细胞形态变化;免疫组化双标法检测细胞表型标志物α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth
muscleactin,α-SMA)和E-钙黏连素(E-cadherin)的表达;免疫组化单染法检测NRK52E细胞TGF-β1和ILK的表达,采用图像分析软件定量分析免疫组化染色结果;酶联免疫吸附测定法测定NRK52E细胞分泌的纤维连接蛋白(fibronectin,FN)含量。结果:与空白对照组比较,IL-1β诱导TEMT的同时TGF-β1和ILK表达增加(P<0.05),大黄素可明显抑制IL-1β诱导的上述变化(P
目的:比较结缔组织生长因子(CTGF)在瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常真皮成纤维细胞(NF)中的表达以及对血清刺激的反应;研究介导CTGF在KF中表达的信号途径。方法:在血清刺激前30min给予小分子人工合成的信号通路抑制剂预处理,分别为:PI3K抑制剂wortmannin(100nM);ERK抑制剂PD98059(50mM);p38MAPK抑制剂SB203580(10mM);JNK抑制剂SP600125(25mM);以及TGF-βI型受体抑制剂SB431542(0.1μM、0.5μM、1μM和10μM),空白对照组仅加入溶剂DMSO预处理。使用定量实时反转录聚合酶链反应比较CTGF在瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)和正常皮肤来源的成纤维细胞(NF)中的表达。结果:KF血清刺激后CTGF的表达迅速升高,而在NF血清刺激后仅少量上升。JNK抑制剂SP600125和TGF-βI型受体抑制剂SB431542对CTGF表达的升高具有显著的抑制作用(P<0.05)。结论:KF中的CTGF血清反应需要JNK和TGF-β信号途径的协同作用。
目的:探讨B型钠尿肽(BNP)抑制心成纤维细胞(CFs)增殖机制与转化生长因子-β1(transforming
点击此处 并且 growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号传导途径的关系。方法:原代提取乳鼠的心CFs,以重组人心肌营养素刺激细胞增殖,分为:BNP组(A组)、SB431542组(B组)、BNP+SB431542组(C组)、对照组(D组)。收集培养液检测细胞因子TGF-β1,收集细胞提取总RNA以荧光实时定量RT-PCR检测Smad4 mRNA变化。结果:A、B、C组TGF-β1浓度较D组明显降低而Smad4 mRNA的△CT值较D组明显升高(P0.05);C组Smad4 mRNA△CT值高于A组和B组。结论:BNP抑制CFs增殖机制除了TGF-β1/Smad2/3信号途径,还可能存在TGF-β1非Smad2/3信号传导途径。
本文探索了应用反向对接技术研究激酶抑制剂选择性的可行性。首先通过收集晶体结构数据或使用同源建模方法建立了包含422个激酶的靶点三维结构数据库,在此基础上建立了反向对接激酶靶点筛选方法,并对相关参数和打分函数进行了优选。最后,选取了7个典型的选择性激酶抑制剂作为例子,用于测试该反向对接激酶靶点筛选方法。结果表明,这些激酶抑制剂的选择性作用靶点均具有较高的打分值(打分值均排在所测试激酶的35%以内)。本文的研究提示,反向对接技术可以应用于激酶靶点虚拟筛选,并进而应用于激酶抑制剂的选择性研究。
目的:观察血管紧张素-(1-7)对TGF-β1诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖以及Smad3、Smad7mRNA表达的影响。方法:分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,以Ang-(1-7)、TGF-β1、Ang-(1-7)+TGF-β1组、TGF-βⅠ型受体抑制剂等干预,通过WST-1法检测细胞增殖,RT-PCR测定心脏成纤维细胞Smad3、Smad 7mRNA的表达。结果:①与空白对照组比较,TGF-β1组心脏成纤维细胞的OD值增加(P<0.