化学合成siRNA-BCL2和siRNA-NC,体外转染PDTC细胞,从mRNA水平和蛋白水平评价siRNA沉默细胞内BCL2表达的效率。PDTC细胞经OGD作用后,检测细胞内凋亡下游蛋白Caspase3的表达变化及LDH含量变化,评价siRNA-BCL2促进PDTC细胞凋亡的作用。 3. siRNA-BCL2转染联合’。’Wortmannin碘辐射在PDTC田胞中的作用研究 PDTC细胞中siRNA-BCL2和131碘联合应用的实验分四组：双阴性组(转染siRNA-NC,无131碘辐射)、siRNA-BCL2单独应用组(转染siRNA-BCL2,无131碘辐射)、131碘单独应用组(转染siRNA-NC,有131碘辐射)和联合应用组(转购买Dinaciclib染siRNA-BCL2,有131碘辐射)。PDTC细胞转染siRNA-BCL2或siRNA-NC24h后,加入131碘(每个35mm培养板加入60μCi131碘)作用20min后,转入正常培养环境中常规培养。6h后,用γ计数仪测定双阴性组和siRNA-BCL2单独应用组摄碘能力：用Western B3-MA浓度lot检测细胞内凋亡下游蛋白Caspase3的表达,用LDH试剂盒测定LDH含量,用流式细胞仪AnexinV/PI双染法测定四组PDTC细胞的凋亡率。 结果 1. PDTC细胞模型的制备及鉴定 低剂量的’3。碘辐射FTC-133后细胞摄碘能力下降,且在48h内随时间延长呈逐渐下降趋势,48h辐射后细胞摄碘能力最低,甲状腺特征性蛋白表达明显下降,细胞增殖能力增强,即PDTC制备成功。