5h、3h、6h、12h、24h五个时间点，每个时间点分为假手术组、模型组和HSYA治疗组(n=3)，给药方法同上。选用包括与血管新生密切相关的生长因子、生长因子受体、黏附分子、转录因子等113个基因的血管生成功能分类基因芯片，检测HSYA在各个时间点对大鼠缺血侧皮层半暗带中血管新生相关基因转录水平的影响。使用综合型GEArray表达分析配套软件进行完整的芯片数据分析。 3．在分析基因芯片结果的基础上，应用RT-PCR法观察HSYA对线栓法致急性脑缺血后1.5h、3h、6h、12h、24h缺血侧皮层半暗带中HIF-1α、VEGF、Flt、bFGF、aFGF五个血管新生密切相关基因的mRNA表达的影响，以GAPDH为内参，结果采用图像分析软件进行半定量分析。同时采用实时定量PCR法分析HSYA对大鼠急性脑缺血后3h、24h缺血侧皮层半暗带中HIF-1α、VEGF

并且 mRNA表达的影响。以GAPDH为内参，获得HIF-1α、VEGF mRNA的相对含量做组间比较。 4．采用Western Blotting法分别观察HSYA对线栓法致急性脑缺血后1.5h、3h、6h、12h、24h缺血侧皮层半暗带中HIF-1α、VEGF、Flt、bFGF、aFGF蛋白表达的影响，以GAPDH为内参，结果采用图像分析软件进行半定量分析。 结果： 1．与假手术组相比，缺血后6h、12h和24h，模型组大鼠神经行为障碍明显，脑梗死体积显著增加，阳性对照药MK801静脉给药明显改善脑缺血动物神经症状，减小脑梗死体积(P＜0.05)；HSYA给药组各个时间点动物神经行为症状均得到明显改善，脑梗死体积显著减小(P＜0.05)。 2．基因芯片结果提示，与假手术组比较，缺血24小时内MCAO模型组有75个基因表达发生显著变化，其中19个显著上调，56个显著下调；大部分血管新生激活基因(如缺氧诱导因子、酸性成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子等)在缺血后有不同程度的表达下调；IL-1β、MCP-1等炎症和趋化因子基因持续上调；抗炎细胞因子IL-10在缺血后3h和24h显著下调。而HSYA给药组，有85个发生显著变化，其中58个显著上调，27个显著下调。上调最为明显的是血管新生诱导因子基因(如HIF-1α、VEGF、aFGF、Ang2等)和炎症相关因子基因(女HIL-6、IL1β、IL-10等)；下调的有凝血酶敏感素等基因。

3．RT-PCR和实时定量PCR结果综合显示，与假手术组比较，缺血后3小时模型组脑皮层半暗带的VEGF、HIF-1α、Flt、bFGF基因表达有显著下调(P＜0.05)，而HSYA可使aFGF、bFGF、Flt、HIF-1αmRNA表达明显上调(P＜0.05)；缺血后24h，在模型组中HIF-1α、Flt mRNA表达上调的基础上，HSYA可使bFGF、VFGF mRNA表达显著增加(P＜0.05)。 4．蛋白免疫印迹研究显示，MCAO后24h内，HSYA可先后使缺血侧脑皮层半暗带HIF-1α、Flt、aFGF、bFGF蛋白的表达显著上调，与模型组比较有显著差异(P＜0.05)，其上调作用具有不同的时相性。HSYA可上调VEGF的蛋白表达，但与模型组比较未见显著差异。 结论： 基因芯片结果提示内源性的促血管新生相关基因的表达在脑缺血后24h内经历了一个先下降后上调的动态过程，同时提示HSYA促血管新生早期的分子作用机制是一个多因子多通路参与的网络化过程，其中对血管新生相关基因(如HIF-1α、VEGF、aFGF、Ang2、Ephrin-A1等)的上调作用可能是其分子基础之一。在基因芯片的基础上，通过分子生物学技术初步证实aFGF、bFGF、Flt、HIF-1α、VEGF等因子在转录和蛋白水平的上调可能是HSYA促血管新生的主要分子基础。HSYA对于其它血管新生基因的调控作用还有待进一步实验的探讨。 Autophagy inhibitor 以上结果既为前期观察到的血管新生现象提供了分子水平的解释，又为下一步更深入的探讨HSYA促血管新生的作用机制提供了靶标。
Recent

advances in molecular targeted therapies, including targeting human epidermal growth factor receptor 2(HER2), had a major 那个 forward step in the therapy for gastric cancer patients. Application of HER2-targeted therapies, in particular trastuzumab in combination with chemotherapy in metastatic HER2-positive gastric cancers, resulted in improvements in response rates, time to progression and overall survival. Nevertheless, as with breast cancer, many patients with gastric cancer develop resistance to trastuzumab. Several promising therapies are currently being developed in combination with chemotherapy to increase the efficacy and overcome the cancerresistance. Here we review the current overview of clinical application of agents targeting HER2 in gastric cancer. We also discuss the ongoing trials supporting the use of HER2-targeted agents combined with cytotoxic agents or other monoclonal antibodies.