05%透明质酸酶和0.2%Ⅱ型胶原酶)获得分散的大鼠肋生长板软骨细胞(rat costochondral growth plate chondrocyte,RGC),常规接种,单层培养。对原代～第5代RGC进行生长动力学分析,并通过免疫细胞化学、阿尔新兰染色和Western blot检测原代～第5代RGC中Ⅱ型胶原、α-SMA和蛋白多糖的分布和表达。 结果:原代培养的生长板软骨细胞中95%以上的细胞Ⅱ型胶原阳性染色,细胞核周围和细胞膜周边都有Ⅱ型胶原的阳性染色,阳性染色的纤维包裹着细胞核,保持圆形的细胞强阳性染色。随着传代次数的增加,表达Ⅱ型胶原的细胞比例和表达量下降,第6代RGC中仅保持圆形的细胞仍呈阳性染色。原代培养的RGC表达大量的蛋白多糖,阿尔新兰阳性染色。第2,3代阿尔新兰染色减少,3代后阿尔新兰染色皆呈阴性。原代RGC中,α-SMA的表达很弱,随传代次数增加,α-SMA的表达量逐渐增高;Ⅱ型胶原的表达刚好和α-SMA相反,原代RGC表达最强,随着传代次数的增加,表达逐渐下降。

可能 结论:成功建立大鼠肋生长板软骨细胞的体外培养模型。单层培养的RGC在第4代后逐渐失去分化表型,α-SMA可以作为RGC去分化的一个新的标志物。
血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)是机体一类重要的细胞群体,在血管通透性屏障、免疫防御及炎症反应中起着极其重要的作用[1,2]。能够合成并分泌多种活性因子,其中IL-6、ICAM-1 较有代表性,而IL-6 则被认为是内皮炎症反应的最佳标志分子[2]。越来越多的研究表明,内皮细胞作为LPS 作用的靶细胞,在LPS 引起的脓毒症、脓毒性休克、多器官功能衰竭等病理过程中起着关键的作用,目前认为血管内皮功能障碍及凋亡不仅是心脑血管疾病发生的共同环节,而且是败血症、休克、创伤等应激情况下发生MODS 和ARDS 的重要原因。在ARDS

发生过程中,血管内皮细胞既是靶细胞也是效应细胞,它的损伤与激活是机体发生失控性炎症反应及高通透性肺水肿的根本环节[1]。糖皮质激素(glucocorticoid,GC)对ARDS 的抗炎作用必然会以血管内皮细胞作为一个主要靶点,但长期以来有关糖皮质激素治疗ARDS 的研究多以临床观察为主,而一些涉及到血管内皮的基础研究则主要探讨白细胞与血管内皮的粘附及对内皮的损伤,而涉及到糖皮质激素作用机制的研究则主要在受体水平进行。有关糖皮质激素治疗ARDS 时对血管内皮保护的机制,特别是受体前调节机制的研究目前尚未见报道。 本实验以内毒素脂多糖LPS(lipopolysaccharide,LPS)致伤体外培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC) , 然后观察糖皮质激素(Dexamethasone,Dex)对HUVEC Roxadustat 受伤前后不同时点表达IL-6、ICAM-1 等细胞因子的影响,及HUVEC 发生凋亡的情况,以确定其对血管内皮的炎性损伤是否具有保护作用。然后用RT-PCR 等方法观察人脐静脉内皮细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)、盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor,MR)及糖皮质激素受体前调节的关键酶11β-羟基类固醇脱氢酶(11-βhydroxysteroid dehydrogenase, 11β-HSD)基因的表达变化,并观察11β-HSD 的经典抑制剂甘草次酸(glycyrrhizic acid,GA)在其中的作用。力图阐明糖皮质激素保护血管内皮炎性损伤的受体前调节机制,探讨其在ARDS

哪里 治疗中的意义。 主要研究结果和结论如下: 一、不同浓度LPS 刺激人脐静脉内皮细胞,在刺激3h 开始时即可使HUVEC
目的 观察角膜创伤愈合过程中,角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况;结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)及转化生长因子-β_1(Transforming Growth Factor-β_1,TGF-β_1)、Ⅰ型胶原和纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN)的表达,TGF、CTGF对角膜创伤愈合的作用,并对二者之间的相互作用及与此有关的Smad信号传导通路做初步的研究。 方法 随即选择Albino纯种白兔35只,空白对照组:2兔4眼。单纯角膜创伤组:又分术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。TGF抗体组:颞侧球结膜下注射15.5μgTGF抗体(经预实验选择得到的浓度)又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。Smad_4抗体组:颞侧球结膜下注射20μgSmad4抗体;又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。实验眼首先施一直径3毫米,包含0.05mm实质层的板层角膜切除术,TGF抗体组及Smad_4抗体组术眼球结膜下注射TGF-β_1抗体或smad4抗体。用免疫组化及mRNA原位杂交方法分别检测CTGF、TGF-β_1、FN蛋白术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天的表达及Ⅰ型胶原、CTGFmRNA在术后6h、3天、7天、21天的表达;角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况。免疫组化所检蛋白、mRNA原位杂交所检mRNA表达强度用组织学评分∑pi表示,其中p代表阳性细胞数所占计数细胞百分比,I代表细胞染色强度。P和I均划分为0、1、2、3分。∑pi为阳性细胞数量和着色强度两项得分相加所得结果。每个角膜选3个切片进行免疫组化或原位杂交染色,每张切片随机选取3个视野(×400),共9个视野,分析结果进行
研究背景 血液流动对血管产生力的作用,这对于心血管系统稳态的维持有着重要的意义,这些力分为沿血流方向与血管平行的剪切力,垂直于血管壁的压应力和沿血管壁周向的拉应力。此外,它们也在心血管疾病,如动脉粥样硬化等的发生、发展过程中扮演着重要的角色。剪切力,作为血流动力的水平分量,不仅会影响内皮细胞的形态、迁移、分化和增殖,而且还通过调节内皮细胞不同基因的表达,在心血管系统的病理和生理过程中起重要作用。在内皮细胞,已发现多种受剪切力调节的基因,根据它们的生物学特性,大致可以分为血管活性物质、生长因子、粘附分子、趋化因子、凝血因子和原癌基因等。我们前期工作表明层流状态的低剪切力(4.