结果 HHT能够与Imatinib协同抑制KCL22细胞生长并诱导其凋亡,并在多个剂量和不同作用时间下,二者均表现协同的作用;能显著引起凋亡蛋白PARP的裂解,并下调抗凋亡蛋白Mcl-1的表达水平。结论
目的观察miRNA-100低表达的间充质干细胞(MSC)对急性髓细胞性白血病细胞增殖、凋亡的影响,初步探讨其相关机制。方法 MSC分别感染miRSelleck-100-NC和miR-100-inhibitor慢病毒,与人白血病细胞株K562共培养3 d后获取K562细胞,分别分为对照组和低表达组;采用MTT实验和平板克隆实验检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting法检测细胞中的细胞周期蛋白细胞周期依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白1(CWortmannin供应商yclin D1)和凋亡相关蛋白Bcl-2样蛋白x(Bax)、cleaved Caspase-3。筛选出感染miR-100-NC和miR-100-inhibitor慢病毒的MSC中差异表达最明显的生长因子为骨形态发生蛋白4(BMP4),采用ELISA法检测K562细胞培养液中的BMP4。将K562细胞分为对照组、低表达组和实验抑制剂组,对照组细胞与感染miR-100-NC慢病毒的MSC共培养,低表达组和实验组细胞与感染miR-100-inhibitor慢病毒的MSC共培养,实验组共培养1 d后加入BMP抑制剂Noggin蛋白;培养2 d后收集K562细胞,采用MTT实验和平板克隆实验检测增殖能力,流式细胞术检测凋亡细胞,Western blotting法检测CDK4、Cyclin D1、Bax、cleaved Caspase-3。