将发夹DNA 2 (H2)通过AuS键连接到Au纳米粒子表面,再利用EDC/NHS活化实现Gln-GQD的-COOH与硫堇(Thi)的氨基缩合,得到H2-Gln-GQD/Au-Thi氧化还原探针,基于此构建了无酶放大电化学传感平台。在CYFRA21-1存在下,此传感平台的H2可与预先修饰在金电极表面的发夹DNA 1(H1)杂交,释放出一个CYFRA21Bindarit生产商-1分子,所释放的CYFRA21-1可直接用于下一次靶DNA循环。通过靶诱导的DNA自组装链式反应,一个CYFRA21-1靶分子可将多个氧化还原探针固定在金电极表面,从而产生显著的电化学信号放大效应。H2与H1的杂交实现对靶DNA的特异性响应,Thi在电极表面发生可逆性氧化还原反应,对靶DNA的响应产生电化学信号,而Gln-GMEK 抑制剂QD/Au原位催化Thi的氧化还原反应将进一步放大检测信号。CYFRA21-1浓度在2~100000 fmol/L之间,其差分脉冲伏安峰电流随CYFRA21-1浓度增加而线性增大。本方法检出限为0.67 fmol/L(S/N=3),灵敏度明显优于文献报道的方法。本方法成功用于人血清中CYFRA21-1的电化学检测。
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DNA甲基化在动物组织发育和分化等生物过程中发挥至关重要的作用。本研究采用荧光标记甲基化敏感扩增多态性(fluorescence-labeled methylation sensitive amplified polymorphism, F-MSAP)技术分析了中华菊头蝠(Rhinolophus sinicus)脑、心、肾、肝、肌肉、棕脂和白脂等7种组织的基因组DNA甲基化模式和水平,及其组织差异性。