05);GTY、ZYY、BYY组与Control、OVX组比较,ALP活性在不同的时间偶有不同程度的提高(P0.05),而OVX、GTY、ZYY、BYY组BMSCs中Cbfα1蛋白表达显著降低(P<0.05);与OVX组比较,ZGW和Sham组能明显上调BMSCs中Cbfα1蛋白表达(P0.05)。与ZGW组比较,YGW、GTY、ZYY、BYY、BJL组BMSCs中Cbfα1蛋白表达显著减少(P<0.05),且ZGW组高于BJL组;而ZGW、YGW、GTY、ZYY组能显著提高BMSCs中ColⅠ蛋白的表达(P0.05),而Control、BYY和BJL组在加入PD98059阻滞剂后与Control组比较BMSCs中Cbfα1m http://www.selleckchem.cn/products/ulixertinib-bvd-523-vrt752271.html RNA表达有了明显的降低(P0.05),而OVX、Sham、GTY、ZYY组BMSCs中Cbfα1蛋白表达显著降低(P<0.05);与OVX组比较,ZGW和BJL组能明显上调BMSCs中Cbfα1蛋白表达(P0.05),此二者与前面实验结果相符。加入PD98059阻滞剂后,Control、组与没有加阻滞剂时相比BMSCs中Cbfα1蛋白表达有了明显的降低(P<0.05),而ZGW、YGW和BYY组在加入PD98059阻滞剂后BMSCs中Cbfα1蛋白的表达与Control组比较也有所降低(P0.05),而Control、BYY和BJL组在加入PD98059阻滞剂后与Control组比较BMSCs中ColⅠm
RNA表达有了明显的降低(P0.05),而ZGW与YGW组显著提高了BMSCs中ColⅠ蛋白表达(P<0.05)。与OVX组比较,ZGW、YGW、BYY和BJL组能明显上调BMSCs中ColⅠ蛋白表达(P0.05),这也与前面的实验结果相一致。而加入PD98059阻滞剂后,除Sham外,与Control组比较其余各组加入阻滞后BMSCs中ColⅠ蛋白的表达均显著减少(P<0.05)。结论:1.PMOP大鼠BMSCs的成骨增殖与分化能力下降。2.左、右归丸及其拆方可促进PMOP大鼠BMSCs增殖和分化,并且左、右归丸促进BMSCs成骨分化作用较其拆方更佳,而左归丸与右归丸相比左归丸促进作用更强,说明有“阳中求阴”及“阴中求阳”之义的左归丸与右归丸促进成骨作用明显要优于单一补阳或补阴的滋阴方、补阳方。3.左、右归丸及其拆方促进PMOP大鼠BMSCs成骨分化可能是通过调节或者改善ERK信号通路完成的,这可能是左、右归丸防治绝经后骨质疏松症的机制之一。
肺炎链球菌是一种能够引起肺炎、中耳炎、脑膜炎和脓毒血症的主要病原菌之一,对儿童和老年人的危害尤为突出。接种有效的疫苗是预防肺炎链球菌感染的一种常用措施。在前期研究中,我们获得了一株2型肺炎链球菌减毒株SPY1。实验研究发现将其作为活菌疫苗免疫小鼠后,能有效保护小鼠抵抗肺炎链球菌感染,进一步的机制研究发现这种免疫保护作用与Th17型免疫应答有关。然而SPY1引起Th17应答的具体机制并不清楚。抗原提呈细胞,如树突状细胞(DC)和巨噬细胞(MΦ)在固有免疫应答和适应性免疫应答中都发挥着极为重要的作用。在本研究中,我们成功培养了小鼠骨髓来源的巨噬细胞和树突状细胞,将SPY1分别与巨噬细胞和树突状细胞作用后,观察其对这些抗原提呈细胞免疫应答的作用及应答的潜在机制。结果显示：SPY1与巨噬细胞作用后,能够引起巨噬细胞产生强烈的免疫应答,分泌大量TNF-α、IL-6和IL-12等细胞因子。由于TLR2和TLR4在肺炎链球菌引起的免疫应答中起重要作用,我们进一步利用相应缺陷鼠研究了TLR2和TLR4在SPYl引起的巨噬细胞免疫应答中的作用,结果提示SPY1引起的巨噬细胞应答并不依赖于TLR2和TLR4。
点击此处 SPY1能够激活巨噬细胞内MAPK PI3K和NF-KB信号通路,经相应抑制剂处理后,SPY1引起的巨噬细胞应答显著减弱,表明SPY1可通过MAPK. PI3K和NF-κB信号通路引起巨噬细胞免疫应答。与树突状细胞作用后,我们发现SPY1能够有效激活DC,促使其高表达TNF-α,IL-6、IL-23和IL-12等细胞因子以及协同刺激分子CD40、 CD86和MHCⅡ,并且能够活化MAPK和NF-κB信号通路。与野生菌株D39相比,SPY1激活DC成熟活化的能力显著强于D39。进一步将SPY1活化的DC与小鼠同源异体的CD4T细胞共培养,我们发现SPY1活化的DC能够有效促进Th1和Th17细胞分化。为进一步明确DC的作用,我们将SPY1处理后的DC过继转移给小鼠后,发现这种接受了SPY1活化的DC免疫后的小鼠脾细胞同样能够产生显著的Th1和Th17免疫应答,而D39活化的DC产生的Th1和Th17免疫应答十分微弱。总之,本研究我们发现肺炎链球菌减毒活疫苗SPY1能够有效激活巨噬细胞和树突状细胞,产生强烈的免疫应答。SPY1引起的巨噬细胞免疫应答不依赖于TLR2和TLR4,但可通过MAPK、PI3K和NF-κB多条信号通路引起巨噬细胞免疫应答。SPY1通过MAPK和NF-κB通路使DC成熟活化,产生IL-6等细胞因子和协同刺激分子,使初始T细胞极化为Th17细胞,从而产生强烈的Th1和Th17型免疫应答。
长期以来,ATP仅被认作是参与细胞内各种代谢循环的能量物质,近年来发现其作为一种“危险信号”在生物体生理病理过程(如：神经损伤、心血管系统疾病以及机体免疫等)中,发挥着重要的作用。目前机体抵御细菌感染的治疗主要依靠广谱抗生素,而耐药性的产生对滥用抗生素提出了一个严峻的考验；学者发现机体在抗菌感染过程中除了释放细胞因子/炎症因子外,还会有ATP的释放,其势必在该过程中发挥着某种重要作用,这为机体抵抗细菌感染的调节提供了一个新的思路。那么研究在机体抗菌感染过程中ATP的释放规律,了解ATP是通过何种机制(通道)被释放,以及ATP通过其受体调控免疫系统在抵御细菌感染这个过程中所发挥的作用及其分子机制就显得极为关键,但是到目前为止还没有相关文献进行系统的报道。固有免疫作为机体抵抗外界入侵的第一道防线,当细菌、病毒等病原微生物入侵宿主后首先被激活,参与该过程的免疫细胞主要有巨噬细胞、树突状细胞(DCs)等,通过表达在其细胞膜上或膜内的模式识别受体PRRs(Pattern-recognition
所以 Receptors)快速识别病原体,阻止感染并清除凋亡、突变以及死亡细胞,在抵御外界病原体入侵、维护自身稳定和清除异常细胞中起主要作用。巨噬细胞在免疫系统中主要通过分泌细胞/炎症因子、招募免疫细胞迁移至炎症部位、吞噬病原体并递呈抗原等方式行使功能。在本文的研究中,我们选取小鼠巨噬细胞系RAW264.