通过多年努力,系统地建立了一个具有短、中、长期目标的创新药物研发体系。”
“<正>风湿免疫性疾病病种多、发病机制不明,但几乎每一种风湿免疫性疾病都要涉及到复杂的人体免疫调节失衡,其中尤以免疫过度反应为主[1]。风湿病治疗过程中长期应用激素、免疫抑制剂治疗加重免疫紊乱,导致继发感染等疾病发生。”
“目的:探讨冬凌草乙素(ponicidin,PON)对白血病K56FK866 nmr2细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法:以不同浓度的PON(10~50μmol.L-1)作用于体外培养的K562细胞24,48,72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,收集药物作用72h后的细胞Annexin V染色并通过流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,瑞氏-姬姆萨染色观察细胞凋亡时的形态学变化。应用免疫印迹法(Western blselleckot)检测caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP的表达水平,并对MAPKs(mitogen-acti-vated protein kinase)信号转导通路相关蛋白(p-P38,p-ERK和p-JNK)以及PI3K(磷脂酰肌醇-3-激酶)/AKT信号通路中的p-AKT,p-P85蛋白的表达水平进行检测。结果:30并且μmol.L-1以上的PON可显著抑制细胞的生长,并呈现出明显的量-效与时-效关系,FCM检测结果表明,不同浓度的药物作用72 h后,随药物浓度的增加细胞凋亡率逐渐升高,50μmol.L-1的PON作用不同时间后在瑞氏-姬姆萨染色下可见典型的核浓缩及核碎裂等细胞凋亡现象。Western blot检测结果表明,药物作用48 h后caspase-3被活化出现17 kD的亚单位,同时PARP被裂解出现89 kD的亚单位片段。